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1、 确立细胞株：在体外培养的哺乳类动物的细胞，一般在数月中，经数十代的继代培养。
2、则产生增殖危机（cris-is），即增殖能力显著降低，以至最后死亡。
3、危机产生的时期，在小鼠、大鼠和仓鼠中都比较早，人胎儿二倍体成纤维细胞株可长达50—80代。
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